消減探針的原理和應用
中文名稱消減探針英文名稱subtracted probe定 義經過消減雜交所構建的互補DNA探針。即將一種細胞或組織的全部信使核糖核酸(mRNA)逆轉錄合成單鏈cDNA,再與第二種細胞(不同類型或不同狀態下的細胞)過量的mRNA或cDNA雜交,留下第一種細胞cDNA未被雜交的部分,制備成標記探針,用以篩選在某種狀態下特異表達的基因。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)......閱讀全文
消減探針的原理和應用
中文名稱消減探針英文名稱subtracted probe定 義經過消減雜交所構建的互補DNA探針。即將一種細胞或組織的全部信使核糖核酸(mRNA)逆轉錄合成單鏈cDNA,再與第二種細胞(不同類型或不同狀態下的細胞)過量的mRNA或cDNA雜交,留下第一種細胞cDNA未被雜交的部分,制備成標記探針,
消減雜交的方法和應用介紹
中文名稱消減雜交英文名稱subtracting hybridization定 義利用不同組織、細胞或不同狀態下組織、細胞基因表達的差異性,并結合核酸雜交建立的克隆差異表達基因的技術。一般是將一種細胞的互補DNA(cDNA)或信使核糖核酸(mRNA)與第二種細胞cDNA或mRNA相互雜交,其不被雜交
阻抑消減雜交的方法和應用介紹
中文名稱阻抑消減雜交英文名稱suppressive subtraction hybridization;SSH定 義將阻抑性聚合酶鏈反應與消減雜交相結合的實驗方法,能有效地擴增低豐度的差異基因表達序列。一般是將目標互補DNA(cDNA)5′端分別加上兩種人工接頭,用過量的驅動DNA進行兩次雜交,得
消減雜交的概念和意義
消減雜交(subtractive hybridization,扣除雜交) 是指利用不同組織、細胞或不同狀態下組織、細胞基因表達的差異性,并結合核酸雜交建立的克隆差異表達基因的技術。是差別雜交的改進,用過量的參照細胞的mRNA 或CDNA 與目的細胞的CDNA 或mRNA (目的序列) 雜交,形成的R
抑制消減雜交的概念和意義
抑制消減雜交(suppression subtractive hybridization,SSH) 是建立在抑制PCR 與消運用雜交二級動力學原理,減雜交技術相結合的基礎上的更簡單快速的分離差異基因的方法。即豐度高的單鏈DNA 在退火時產生同源雜交的速度快于豐度低的單鏈DNA,使原來在豐度上有差別的
生物發光探針的概念和應用
中文名稱生物發光探針英文名稱bioluminescent probe定 義用生物體內產生發光現象的物質或參與發光反應的輔助因子(如在螢火蟲發光反應中起作用的螢光素/螢光素酶)與某些分子相連接所構成的探針。可用于對體內或體外相關物質的追蹤分析研究。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術
DNA探針的概念和應用特點
DNA探針(DNA probe)是最常用的核酸探針,為長度在幾十到幾百甚至上千堿基對的單鏈或雙鏈DNA,用特殊示蹤劑(如同位素、酶或有色基團)進行標記;在適當的pH值、溫度和離子強度下,DNA探針利用分子的變性、復性以及堿基互補配對的高度精確性,能與待測樣本中互補的非標記單鏈DNA或RNA以氫鍵結合
染色質消減的定義和過程
在細胞分裂過程將部分染色質放于核外而失掉的過程。指向體細胞分化的細胞,在細胞分裂過程將部分染色質放于核外而失掉的過程。某種蛔蟲在卵裂過程中放出復合染色體的末端部分,產生了染色質消減,對將來可成為生殖細胞的細胞則無此消減現象。僅生殖細胞所保持的染色質,約占全染色質的24%,此部分DNA的比重較小,據報
俘獲性探針的技術特點和應用
中文名稱俘獲性探針英文名稱capture probe定 義為捕獲目的分子而使用的探針。此類探針常是固相化的。如用結合在磁性顆粒(磁珠)表面的寡核苷酸為探針,從核酸文庫中篩選出特定的核酸克隆;為尋求能與某蛋白質特異結合的多肽序列,以吸附在反應板上的該蛋白質為探針,從重組噬菌體呈現文庫中捕獲特定的噬菌
雜交探針的技術特點和應用介紹
雜交探針是核酸分子上帶有可能被檢測的信號分子,如同位素或熒光標記的核酸分子。雙鏈DNA加熱變性成為單鏈,隨后用放射性同位素(通常用磷-32)、螢光染料或者酶(如辣根過氧化物酶)標記成為探針。磷-32通常被摻入組成DNA的四種核苷酸之一的磷酸基團中,而熒光染料和酶與核酸序列以共價鍵相連。分為cDNA探
電子探針的功能和應用特點
電子探針是一種利用電子束作用樣品后產生的特征X射線進行微區成分分析的儀器,可以用來分析薄片中礦物微區的化學組成。除H、He、Li、Be等幾個較輕元素外,還有U元素以后的元素以外都可進行定性和定量分析。電子探針的大批量是利用經過加速和聚焦的極窄的電子束為探針,激發試樣中某一微小區域,使其發出特征X射線
四探針測試儀原理和組成
?多功能數字式四探針測試儀是運用四探針測量原理測試電阻率/方阻的多用途綜合測量?儀器。該儀器設計符合GB/T?1551-2009?《硅單晶電阻率測定方法》、GB/T?1551-1995《硅、鍺單晶電阻率測定直流兩探針法》、?GB/T?1552-1995《硅、鍺單晶電阻率測定直流四探針法》并參考美國?
消減雜交的定義
利用不同組織、細胞或不同狀態下組織、細胞基因表達的差異性,并結合核酸雜交建立的克隆差異表達基因的技術。一般是將一種細胞的互補DNA(cDNA)或信使核糖核酸(mRNA)與第二種細胞cDNA或mRNA相互雜交,其不被雜交的部分就代表了兩種細胞基因表達的差異,可用于差異表達基因的克隆。差示篩選、消減探針
離子探針原理
離子探針(IMA)的基本原理是,用高能負氧離子轟擊樣品表面,測定被飛濺活化出來并發生電離的原子(即離子)的同位素組成,以獲得年齡。為一種得到迅猛發展的新型質譜計,它具有許多其他測年方法所沒有的優點:不需要化學處理;具有高的分辨率,可同時獲得幾組年齡以確定被測對象同位素體系是否封閉,有無鉛丟失;可對樣
消減雜交實驗
消減雜交實驗 ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 稀釋緩沖液 雜交緩沖儲存液 基三乙基溴化銨 礦
消減雜交實驗
試劑、試劑盒稀釋緩沖液雜交緩沖儲存液基三乙基溴化銨礦物油核酸和寡核苷酸儀器、耗材熱循環儀實驗步驟一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑稀釋緩沖液(20 mmol/L HEPES>HCl、pH8.3,50 mmol/LNaCl,0.2 mmol/L EDTA)4X 雜交緩沖儲存液:4mol/L NaCl,2
消減雜交實驗
試劑、試劑盒 稀釋緩沖液雜交緩沖儲存液基三乙基溴化銨礦物油核酸和寡核苷酸儀器、耗材 熱循環儀實驗步驟 一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑稀釋緩沖液(20 mmol/L HEPES>HCl、pH8.3,50 mmol/LNaCl,0.2 mmol/L EDTA)4X 雜交緩沖儲存液:4mol/L NaC
同位素標記的探針和非同位素標記的探針的特點和應用
同位素標記的探針通常有很高的放射比活性,雜交的靈敏度高,但使用期限短,且有放射性危害,污染物處置困難,需要特殊的儀器和設備,不適用于普通實驗室。近年來非同位素標記法得到很大發展,如酶促標記法(如生物素、地高辛標記法)和化學標記法(如熒光生物素、酶標記法)。非同位素標記的探針保存時間較長、避免了同位素
離子探針產品介紹、特點和應用領域
離子探針是用聚焦的一次離子束作為微探針轟擊樣品表面,測射出原子及分子的二次離子,在磁場中按質荷比(m/e)分開,可獲得材料微區質譜圖譜及離子圖像,再通過分析計算求得元素的定性和定量信息。測試前對不同種類的樣品須作不同制備,離子探針兼有電子探針、火花型質譜儀的特點。可以探測電子探針顯微分析方法檢測極限
cDNA探針的原理簡介
cDNA(complementary DNA)是指互補于mRNA的DNA分子。而以此制作的DNA探針稱為cDNA探針。 cDNA是由RNA經一種稱為逆轉錄酶(reverse transcriptase)的DNA聚合酶催化產生的,這種逆錄酶是Temin等在70年代初研究致癌RNA病毒時發現的。該
電子探針的原理
電子探針的原理如圖1所示。圖1(1)電子光學系統。電子束直徑0.1~1μm,電子束穿透深度1~3μm。被激發原子發射特征X射線譜過程如下:圍繞原子核運動的內層電子,被電子束的電子轟擊后,其他外層電子為補充轟擊出的電子而發生躍遷,在躍遷過程中釋放出能量,即發射出X射線。(2)X射線譜儀。測量各種元素產
主機探針的工作原理
溫度探針是一個固定在汽缸壁上的中間具有四個孔的金屬桿。金屬桿的前端穿過汽缸壁插入汽缸與汽輪機內流動做功的蒸汽接觸,受到蒸汽的沖刷,金屬桿在汽缸壁外面部分則予以保溫,一支熱偶裝在探針的一個孔中,它的熱接點敷設在受到蒸汽沖刷的探針前端的金屬中,另一支熱偶裝在探針的另一個孔中,它的熱接點則敷設在距探針前端
RNA探針的應用介紹
這類RNA探針主要用于研究目的,而不是用于檢測。例如,在篩選逆轉錄病毒人類免疫缺陷病毒(HIV)的基因組DNA克隆時,因無DNA探針可利用,就利用HIV的全套標記mRNA作為探針,成功地篩選到多株HIV基因組DNA克隆。又如進行中的轉錄分析(nuclear run on transcrip-tion
吸附的原理和應用
吸附屬于一種傳質過程,物質內部的分子和周圍分子有互相吸引的引力,但物質表面的分子,其中相對物質外部的作用力沒有充分發揮,所以液體或固體物質的表面可以吸附其他的液體或氣體,尤其是表面面積很大的情況下,這種吸附力能產生很大的作用,所以工業上經常利用大面積的物質進行吸附,如活性炭、水膜等。
萃取的原理和應用
萃取又稱溶劑萃取或液液萃取(以區別于固液萃取,即浸取),亦稱抽提(通用于石油煉制工業),是一種用液態的萃取劑處理與之不互溶的雙組分或多組分溶液,實現組分分離的傳質分離過程,是一種廣泛應用的單元操作。利用相似相溶原理。被廣泛運用于食品、化工、醫藥、生物制品等領域。如:香精香料、調味品、中草藥、天然色素
DNA探針檢測法的原理
原理:堿基互補配對。。探針:DNA單鏈-化學連接的標記基團探針和目標DNA(經過加熱,分成單鏈)混合,探針結合的目標DNA就會被標記
電子探針的結構原理
(1)電子光學系統。電子束直徑0.1~1μm,電子束穿透深度1~3μm。被激發原子發射特征X射線譜過程如下:圍繞原子核運動的內層電子,被電子束的電子轟擊后,其他外層電子為補充轟擊出的電子而發生躍遷,在躍遷過程中釋放出能量,即發射出X射線。(2)X射線譜儀。測量各種元素產生的X射線波長和強度,并以此對
DAN探針檢測的技術原理
DNA 或 RNA 片段能識別特定序列基因的 DNA 片段,能與互補的核苷酸序列特異結合,這種用同位素或非同位素標記的單鏈 DNA 片段即為核酸探針。核酸探針技術是將雙鏈 DNA 經加熱或堿處理,使堿基對間的氫鏈被破壞而變性,解開成兩條互補的單鏈。它們在一定溫度和中性鹽溶液條件下,又可按 A-T、G
關于DNA探針的應用介紹
DNA探針可以用來診斷寄生蟲病,現場調查及蟲種鑒定,可用于病毒性肝炎的診斷,遺傳性疾病的診斷,可用于檢測飲用水病毒含量。具體方法:用一個特定的DNA片段制成探針,與被測的病毒DNA雜交,從而把病毒檢測出來。與傳統方法相比具有快速、靈敏的特點。傳統的檢測一次,需幾天或幾個星期的時間,精確度不高,而
RNA探針技術的應用介紹
這類RNA探針主要用于研究目的,而不是用于檢測。例如,在篩選逆轉錄病毒人類免疫缺陷病毒(HIV)的基因組DNA克隆時,因無DNA探針可利用,就利用HIV的全套標記mRNA作為探針,成功地篩選到多株HIV基因組DNA克隆。又如進行中的轉錄分析(nuclear run on transcrip-tion