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  • 細胞膜糖類電鏡顯示實驗——釕紅染色法

    細胞膜糖類 電鏡 顯示技術 免疫組織化學實驗技術及應用 第十四章細胞膜糖類電鏡顯示實驗可以用于:觀察細胞膜上的糖蛋白和糖脂。其顯示技術較常用的是凝集素細胞化學技術,此外,還有釕紅染色法等。實驗方法原理釕紅染色法的原理是釕紅可以與羧基(酸性基)通過靜電結合,電鏡下呈電子密度高染色。實驗材料組織樣品試劑、試劑盒釕紅原液戊二醛二甲胂酸鈉緩沖液鋨酸儀器、耗材移液槍實驗步驟1. 釕紅原液配制釕紅溶于雙蒸水,濃度為 10 mg/ml,60℃,振蕩 10 min,3000 r/min 離心約 15 min,取上清冷藏保存。2. 前固定液 3% 戊二醛 2.5 ml,0.2 mol/L 二甲胂酸鈉緩沖液(pH 7.3)2.5 ml,釕紅原液 2.5 ml 順序混合。3. 后固定液 2% 鋨酸 2.5 ml,0.2 mol/L 二甲胂酸鈉緩沖液(pH 7.3)2.5 ml,釕紅原液 2.5 ml 順序混合。4. 標本切小(1 mm3),置于前固定......閱讀全文

    細胞膜糖類電鏡顯示實驗——釕紅染色法

    細胞膜糖類 電鏡 顯示技術 免疫組織化學實驗技術及應用 第十四章細胞膜糖類電鏡顯示實驗可以用于:觀察細胞膜上的糖蛋白和糖脂。其顯示技術較常用的是凝集素細胞化學技術,此外,還有釕紅染色法等。實驗方法原理釕紅染色法的原理是釕紅可以與羧基(酸性基)通過靜電結合,電鏡下呈電子密度高染色。實驗材料組織樣品試劑

    細胞膜糖類電鏡顯示實驗

    實驗方法原理 細胞膜糖類包括糖蛋白和糖脂,其顯示技術較常用的是凝集素細胞化學技術,此外,還有釕紅染色法等。釕紅染色法的原理是釕紅可以與羧基(酸性基)通過靜電結合,電鏡下呈電子密度高染色。實驗材料 組織樣品試劑、試劑盒 釕紅原液戊二醛 二甲胂酸鈉緩沖液鋨酸實驗步驟 1. 釕紅原液配制釕紅溶于雙蒸水,濃

    凝集素顯示糖類細胞化學實驗

    實驗方法原理 實驗材料 組織樣品試劑、試劑盒 凝集素-膠體金探針鋨酸實驗步驟 1. 制備或購買凝集素-膠體金探針。2. 組織常規固定,游離細胞打散,組織切片切薄。3. 漂洗 3 次。4. 5~25 μg/ml 凝集素-膠體金 15~25℃ 孵育 30~60 min。5. 漂洗、鋨酸固定同常規注意事項

    凝集素顯示糖類細胞化學實驗

    凝集素(lectin)是一種無免疫原性糖蛋白,與糖的結合有一定專一性,如伴刀豆凝集素只與葡萄糖、甘露糖結合,麥胚凝集素只與 N-乙酰葡萄糖結合。并且,凝集素還可與標記物結合,如膠體金、辣根過氧化物酶等,因此可將作為檢測糖基的一種簡單而具有選擇性的探針。不過由于糖類的復雜性以及凝集素特異的相對性,凝集

    糖類染色實驗

    實驗方法原理 糖原由多糖衍化而來,是單純的多糖。糖原易溶于水,所以用特殊的 Carnoy 固定液或無水乙醇直接固定才能較好地保存糖原,常用高碘酸(periodic acid)-Shiff 反應(PAS)染色法。實驗材料 石蠟組織切片試劑、試劑盒 高碘酸蒸餾水堿性復紅鹽酸 焦亞硫酸鈉(偏重亞硫酸鈉)雙

    陰離子位點顯示實驗——聚乙烯亞胺染色法

    實驗材料組織樣品試劑、試劑盒聚乙烯亞胺二甲胂酸鈉緩沖液戊二醛鋨酸實驗步驟1. 用 0.1 mol/L 二甲胂酸鈉緩沖液配 1% 聚乙烯亞胺,含 2% 蔗糖。2. 組織切成小塊,浸泡在聚乙烯亞胺溶液中,室溫下反應 30 min。3. 0.1 mol/L 二甲胂酸鈉緩沖液充分漂洗。4. 3% 戊二醛固定

    細胞外被的概念

    細胞外被(cell coat)又稱糖萼(glycocalyx),指細胞質膜外表面覆蓋的一層黏多糖物質動物細胞表面存在著一層富含糖類物質的結構,稱為細胞外被或糖萼。用重金屬染料如:釕紅染色后,在電鏡下可顯示厚約10~20nm的結構,邊界不甚明確。細胞外被是由構成質膜的糖蛋白和糖脂伸出的寡糖鏈組成的,實

    剛果紅染色法的原理

    剛果紅染色法特指纖維素的染色法,剛果紅能把纖維素染成紅色復合物,對纖維二糖和葡萄糖無作用,可用此來鑒別纖維素或纖維素分解菌的分解作用。剛果紅能與培養基中的纖維素形成紅色復合物。當纖維素被纖維素酶分解后,剛果紅——纖維素的復合物便沒法形成,培養基中會出現以纖維素分解菌為中心的透明圈,通過是否產生透明圈

    剛果紅染色法的方法

    常用的剛果紅染色法有兩種方法一,先培養微生物,再加入剛果紅進行顏色反應在長出菌落的培養基上,覆蓋質量濃度為1 mg/mI。的CR溶液,10~15 min后,倒去CR溶液,加入物質的量濃度為l mol/l的NaCI溶液,15 min后倒掉NaCl溶液,此時,產生纖維素酶的菌落周圍將會出現透明圈。(加N

    細胞骨架觀察實驗——鬼筆環肽顯示微絲蛋白染色法

    實驗材料細胞試劑、試劑盒PBS三硝基甲苯甘油儀器、耗材顯微鏡實驗步驟1. ?蓋片培養細胞(70 %~80 %匯合),PBS洗3 次;2. ?2 %的甲醛/PBS 液(甲醛按37 %)固定3 分鐘;3. ?0.5 %的三硝基甲苯/PBS處理3 次,每次10 分鐘;4. ?PBS漂洗3 次;5. ?用羅

    糖類物質的性質實驗

    試劑、試劑盒 葡萄糖蔗糖果糖麥芽糖乳糖淀粉費林試劑本尼迪克試劑硝酸銀氨水氫氧化鈉α-萘酚乙醇試劑硫酸間苯二酚-鹽酸試劑鹽酸碘試劑棉花硝酸乙醇乙醚濾紙儀器、耗材 酒精燈試管夾試管表面皿坩堝實驗步驟 1.Molish試驗-α-萘酚試驗出糖在試管中加入1ml 5%葡萄糖,滴入2滴10%α-萘酚和95%乙醇

    糖類物質的性質實驗

    試劑、試劑盒葡萄糖蔗糖果糖麥芽糖乳糖淀粉費林試劑本尼迪克試劑硝酸銀氨水氫氧化鈉α-萘酚乙醇試劑硫酸間苯二酚-鹽酸試劑鹽酸碘試劑棉花硝酸乙醇乙醚濾紙儀器、耗材酒精燈試管夾試管表面皿坩堝實驗步驟1.Molish試驗-α-萘酚試驗出糖在試管中加入1ml 5%葡萄糖,滴入2滴10% α-萘酚和95%乙醇溶液

    糖類染色實驗——糖原染色

    實驗方法原理糖原由多糖衍化而來,是單純的多糖。糖原易溶于水,所以用特殊的 Carnoy 固定液或無水乙醇直接固定才能較好地保存糖原,常用高碘酸(periodic acid)-Shiff 反應(PAS)染色法。實驗材料石蠟組織切片試劑、試劑盒高碘酸蒸餾水堿性復紅鹽酸焦亞硫酸鈉(偏重亞硫酸鈉)雙重蒸餾水

    細胞膜完整性及膜轉運功能檢測實驗—乙酰乙酸染色法

    實驗方法原理FDA是一種無熒光的酯酶底物,能被活細胞攝取并在細胞內被酯酶水解形成熒光素。常用方法是將FDA與PI 同時孵育細胞,測定活細胞與死亡細胞比例。實驗步驟1. 主要試劑的配制FDA(Molecularprobes,In.OR,USA)保存液 1 mg/ml 的丙酮溶液。PI(Sigma,MO

    陰離子位點顯示實驗——陽離子化鐵蛋白染色法

    細胞表面存在負電荷,文獻稱為 anionicsites、anionicgroups 或 negativecharges,國內有人稱之為陰離子位點,因為它們在空間平面上呈點陣分布。此外,細胞的基膜上也存在陰離子位點,如血管內皮細胞基底膜,基膜的陰離子位點主要由硫酸肝素蛋白多糖構成,細胞膜與基底膜不同,

    糖類染色實驗——黏液物質染色

    實驗方法原理在人體和動物體中能夠分泌黏液物質,依其物質中含有的酸基不同,所以分為中性黏液、酸性黏液和混合性黏液,也可被稱為中性黏多糖、酸性黏多糖和混合性黏多糖,常用 Mowry 阿爾辛藍高碘酸 Shiff 反應(ABPAS)染色方法。實驗材料石蠟組織切片試劑、試劑盒阿爾辛藍 8 GS冰醋酸蒸餾水麝香

    細胞膜完整性及膜轉運功能檢測實驗—膜聯蛋白-V-染色法

    實驗方法原理細胞凋亡時,其細胞膜上的磷脂分布發生改變,尤其是凋亡早期,細胞膜上的磷脂酰膽堿暴露出來,由于 PS(磷脂酰絲氨酸)外膜化比凋亡引起的核酸變化更早期,成為細胞凋亡的早期指征之一。抗凝劑膜聯蛋白 V 具有與帶負電荷的磷脂酰膽堿結合的特性,因此可采用熒光素標記的膜聯蛋白 V 和 PI 同時染色

    細胞膜完整性及膜轉運功能檢測實驗——HoechstPI-染色法

    實驗步驟1. 主要試劑的配制碘化丙錠貯存液:100 μg/ml,4℃ 避光保存。Hoechst 33258 貯存液:100 μg/ml,4℃ 避光保存。2. 操作流程2.1 常規制備單細胞懸液(方法同 PI 染色法),加入 Hoechst 33258 溶液,使其終濃度為 1 μg/ml,37℃ 孵育

    細胞膜完整性及膜轉運功能檢測實驗——碘化丙錠染色法

    區分活細胞和死亡細胞的關鍵在于死亡細胞膜轉運功能及膜完整性的喪失。許多陽離子染料,如臺盼藍、碘化丙錠(PI)、溴化乙錠(EB)以及7-氨基放線菌素D(7-ADD)等,常被用于檢測細胞的存活率。活細胞由于膜具有完整性而不被著色,死亡細胞(如壞死細胞或晚期凋亡細胞)由于其膜完整性的喪失而被著色。實驗步驟

    怎么檢測細胞通透性

    (1)死/活細胞染色法:使用選擇性死/活細胞染色的特殊染料如不易穿透活細胞膜的臺盼蘭、苯胺黑及用于活細胞著色的中性紅、健那綠、亞甲藍、甲苯胺藍等,通過染色區分死活細胞并計數來間接判斷細胞膜通透性的改變情況。該方法簡單,方便,價廉;但靈敏度和精確性差。(2)熒光標記法:使用二乙酸熒光素(FDP)、碘化

    研究顯示:紅紫藍果蔬抗癌效果好

    ??? 新華網倫敦8月23日電? 美國科學家的一項研究發現,讓某些水果和蔬菜呈現豐富的紅色、紫色和藍色的天然色素能起到有效的抗癌作用。 ??? 在茄子、紅甘藍和歐洲越橘等食品中發現的這些色素化合物能限制癌細胞的生長,在一些情況下還能完全殺死癌細胞,同時不讓健康細胞受損。 ??? 據英國《衛報

    兩種剛果紅染色法有什么優缺點

    剛果紅染色法:常用的剛果紅染色法有兩種,一種是先培養微生物,再加入剛果紅進行顏色反應,另一種是在倒平板時就加入剛果紅。方法一 在長出茵落的培養基上,覆蓋質量濃度為1 mg/mI。的CR溶液,10~15 min后,倒去CR溶液,加入物質的量濃度為l mol/I。的NaCI溶液,15 min后倒掉NaC

    植物組織和細胞的顯微化學染色實驗

    實驗方法原理?植物體內含有許多種化學物質。在得到植物組織切片之后,可以通過組織化學(顯微化學)染色的方法使不同類型的化學成分在顯微鏡下得以顯示,從而了解這些物質在植物的組織細胞內的空間分布用于組織化學研究的切片,根據研究對象和所要檢測的化學物質的不同,可采用石蠟切片,有時要求新鮮材料采用徒手切片或冰

    細胞膜通透性的檢測方法,有哪些

    當細胞膜的通透性發生改變時,一些正常情況下不能透過細胞膜的外部物質進入細胞的量增多,正常細胞內的有些物質也易于釋放到細胞外,檢測細胞通透性變化的方法也就是基于這樣的原理而設計的。常用的細胞膜通透性的檢測方法有:(1)死/活細胞染色法 :?使用選擇性死/活細胞染色的特殊染料如不易穿透活細胞膜的臺盼蘭、

    剛果紅染色法方法一是什么意思

    固體培養基,因為最后能在培養基上看到因分解纖維素形成的透明圈,在液體培養基中不可能形成透明圈。是鑒定培養基,因為該培養基上也能生長其他微生物,例如有些自養型微生物就能在該培養基上生存;!不過只有纖維素分解菌周圍才會形成透明圈,從而將該菌落鑒定出來。區分選擇培養基,例如在配置培養基的時候不添加氮源,那

    細胞膜的制備方法實驗

    從懸浮細胞中制備細胞膜從組織培養皿中的匯合或部分匯合細胞中分離頂層膜、基底膜或中間膜從生長于微載體上的細胞中分離細胞膜實驗材料膠原酶 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?試劑、試劑盒EDTA ? ? ? ? ? ? ? ?

    細胞膜的制備方法實驗

    從懸浮細胞中制備細胞膜 從組織培養皿中的匯合或部分匯合細胞中分離頂層膜、基底膜或中間膜 從生長于微載體上的細胞中分離細胞膜 ? ? ? ? ? ? 實驗材料

    革蘭氏染色法實驗步驟簡介

      步驟  革蘭氏染色法一般包括初染、媒染、脫色、復染等四個步驟,具體操作方法是:  1)涂片固定。  2)草酸銨結晶紫染1分鐘。  3)蒸餾水沖洗。  4)加碘液覆蓋涂面染約1分鐘。  5)水洗,用吸水紙吸去水分。  6)加95%酒精數滴,并輕輕搖動進行脫色,20秒后水洗,吸去水分。  7)蕃紅染

    植物組織和細胞顯微化學染色_顯示細胞壁化學組成方法

    實驗方法原理植物體內含有許多種化學物質。在得到植物組織切片之后,可以通過組織化學(顯微化學)染色的方法使不同類型的化學成分在顯微鏡下得以顯示,從而了解這些物質在植物的組織細胞內的空間分布用于組織化學研究的切片,根據研究對象和所要檢測的化學物質的不同,可采用石蠟切片,有時要求新鮮材料采用徒手切片或冰凍

    碳酸復紅(Basic-Fuchsin)顯示X染色質法

    實驗方法原理在間期細胞核中,女性X染色質和男性Y染色質均可用特殊染色法顯示出來。女性的兩個X染色體中的一個,在間期時的染色質呈異固縮(Heteropyconosis),呈深染的小體稱Barr氏體。Barr氏體位于間期細胞核內面,呈三角形或半月形小體,易為碳酸復紅或硫堇等染料著色。正常女性Barr氏體

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