長春應化所細胞膜結構研究獲進展
細胞膜(cell membrane)是由磷脂、糖和蛋白質組成的生物膜。因結構復雜和研究手段有限,一個世紀以來細胞膜的結構研究仍停留在模型假說階段,細胞膜這一重要的細胞基本成分至今仍是未解難題。 中國科學院長春應用化學研究所研究員王宏達課題組,應用原子力顯微鏡、超分辨熒光顯微鏡和單分子力譜等高分辨、高靈敏的單分子技術,在接近生理條件下對多種細胞膜結構進行了系統深入研究(Nano Letters, 9, 4489 (2009); Nanoscale, 5, 11582 (2013); Cell Research, 24, 959 (2014); PLoS ONE, 9, e91595 (2014))。他們統一了多種模型觀點,闡明細胞膜包括多種特征,如磷脂雙層結構、流動鑲嵌性、脂筏和非脂筏區域共存性、內外膜非對稱性、不同功能細胞膜的差異性等,而不是單一模型可以解決所有的細胞膜問題。相關系列成果發表后被英國化學會《化學會評論》邀請......閱讀全文
細胞膜的流動鑲嵌模型的簡介
流動鑲嵌模型突出了膜的流動性和不對稱性,認為細胞膜由流動的脂雙層和蛋白質組成。磷脂分子以疏水性尾部相對,極性頭部朝向水相組成生物膜骨架,蛋白質或嵌在脂雙層表面,或嵌在其內部,或橫跨整個脂雙層,表現出分布的不對稱性。 不足之處: 1)不能說明膜在變化過程中如何保持膜的完整性和穩定性; 2)忽
關于細胞膜的晶格模型的介紹
1975年,Wallach提出晶格模型。晶格模型是對流動鑲嵌模型的補充,強調流動的整體性。用膜脂可逆地進行無序(液態)和有序(晶態)的相變來解釋生物膜的流動性。膜鑲嵌蛋白對脂類分子的運動具控制作用。鑲嵌蛋白和它周圍的脂類分子形成晶格狀態,這些不移動的脂類分子稱界面脂質,而流動的脂質呈小片、點狀分
細胞膜的板塊鑲嵌模型的功能簡介
1977年,Jain和White提出生物膜是由具有不同流動性的板塊鑲嵌而成的動態結構。? 脂筏模型 脂筏(lipid raft)是質膜上富含膽固醇和鞘磷脂的微結構域(microdomain)。大小約70nm左右,是一種動態結構,位于質膜的外小頁。由于鞘磷脂具有較長的飽和脂肪酸鏈,分子間的作用
關于細胞膜三明治模型和單位膜模型的介紹
J. Danielli & H. Davson1925 發現質膜的表面張力比油-水界面的張力低得多,推測膜中含有蛋白質,從而提出了”蛋白質-脂類-蛋白質”的三明治模型。認為質膜由雙層脂類分子及其內外表面附著的蛋白質構成的。1959年在上述基礎上提出了修正模型,認為膜上還具有貫穿脂雙層的蛋白質通道
如何大量提取細胞膜蛋白
如何大量提取細胞膜蛋白如果是前者,可能確實需要從細胞提總蛋白,pierce的試劑盒肯定是首選的了,細胞量也應該問題不大,腹水收的細胞量還是相當大的但是如果是后者不如考慮異源表達,可能更方便后續的試驗
細胞膜的膜蛋白的相關介紹
細胞膜蛋白質(包括酶)膜蛋白質主要以兩種形式同膜脂質相結合:分內在蛋白和外在蛋白兩種。內在蛋白以疏水的部分直接與磷脂的疏水部分共價結合,兩端帶有極性,貫穿膜的內外;外在蛋白以非共價鍵結合在固有蛋白的外端上,或結合在磷脂分子的親水頭上。如載體、特異受體、酶、表面抗原。占20%~30%的表面蛋白質(
細胞膜蛋白質提取方法
NRC Institute for Biological SciencesTriton X-114 extraction protocol (Hydrophobic protein preparation)Ressuspend cells in Solution A (dil 1/8) and ad
細胞膜蛋白質的提取方法
? 1.熱變性及酸堿變性沉淀法 用于選擇性的除去某些不耐熱及在一定PH值下易變性的雜蛋白。 2.有機溶劑沉淀法 多用于生物小分子、多糖及核酸產品的分離純化,有時也用于蛋白質沉淀。 3.等電點沉淀法 用于氨基酸、蛋白質及其它兩性物質的沉淀。但此法單獨應用較少,多與其它方法結合使用。
紅細胞膜蛋白電泳分析的原理
將制備的紅細胞膜樣品進行SDS-PAGE電泳,根據樣品中各蛋白相對分子質量的不同,分離得到紅細胞膜蛋白的電泳圖譜,從而可見各膜蛋白組分百分率。
細胞膜蛋白靶向降解有了新策略
細胞膜蛋白作為藥物研發的核心靶點,其重要性已被大量臨床藥物證實。細胞膜蛋白靶向降解技術能選擇性清除致病蛋白,展現出更強治療潛力,開辟了藥物研發的新范式。 近日,由中國科學院深圳先進技術研究院醫藥所研究員房麗晶、副研究員陳亮與研究員李紅昌組成的學科交叉團隊,在細胞膜蛋白靶向降解技術方面取得重要進
B細胞膜表面免疫球蛋白的概述
B細胞膜表面有一種特征性的免疫球蛋白(surface membrane immunoglobulin,SmIg)。早期的前B細胞表達 IgM,成熟的B細胞表達IgD、IgM或 IgA、 IgE等。用熒光標記羊抗人 IgG、 IgM、IgA、IgD或IgE抗體,分別與活性淋巴細胞反應,于熒光 顯微
細胞膜蛋白質提取方法蛋白質沉淀法
1.熱變性及酸堿變性沉淀法 用于選擇性的除去某些不耐熱及在一定PH值下易變性的雜蛋白。 2.有機溶劑沉淀法 多用于生物小分子、多糖及核酸產品的分離純化,有時也用于蛋白質沉淀。3.等電點沉淀法 用于氨基酸、蛋白質及其它兩性物質的沉淀。但此法單獨應用較少,多與其它方法結合使用。4.非離子多聚體沉淀法
細胞膜蛋白質提取方法——蛋白質沉淀法(一)
1.熱變性及酸堿變性沉淀法 用于選擇性的除去某些不耐熱及在一定PH值下易變性的雜蛋白。 2.有機溶劑沉淀法 多用于生物小分子、多糖及核酸產品的分離純化,有時也用于蛋白質沉淀。3.等電點沉淀法 用于氨基酸、蛋白質及其它兩性物質的沉淀。但此法單獨應用較少,多與其它方法結合使用。4.非離子多聚體沉淀法
細胞膜蛋白質提取方法——蛋白質沉淀法(二)
第二節 有機溶劑沉淀法有機溶劑的沉淀機理是降低水的介電常數,導致具有表面水層的生物大分子脫水,相互聚集,最后析出。該法優點在于:1)分辨能力比鹽析法高,即蛋白質或其它溶劑只在一個比較窄的有機溶劑濃度下沉淀;2)沉淀不用脫鹽,過濾較為容易;3)在生化制備中應用比鹽析法廣泛。其缺點是對具有生物活性的大分
關于酪蛋白膠粒的Holt模型介紹
由Holt等(1998,2003)提出,在該模型中,酪蛋白膠粒是由酪蛋白分子纏結在一起,形成一個網狀凝膠結構。在這一結構中,膠體磷酸鈣微簇(colloidal calcium phosphate nanoclusters)對膠粒結構起穩定作用,它與鈣敏性酪蛋白中的磷酸絲氨酸簇結合在一起,形成內部
簡述蛋白質折疊的生長模型
根據這種模型,肽鏈中的某一區域可以形成“折疊晶核”,以它們為核心,整個肽鏈繼續折疊進而獲得天然構象。所謂“晶核”實際上是由一些特殊的氨基酸殘基形成的類似于天然態相互作用的網絡結構,這些殘基間不是以非特異的疏水作用維系的,而是由特異的相互作用使這些殘基形成了緊密堆積。晶核的形成是折疊起始階段限速步
胰蛋白酶處理時間延長是否會破壞細胞膜上的糖蛋白
胰蛋白酶主要是使動物細胞間的膠原纖維和細胞外的其他成分酶解,從而使粘連的細胞脫壁懸浮。胰蛋白酶處理時間過長對細胞有毒性作用(一般視濃度在1-4min內終止)。因為其胰蛋白酶配置過程中有添加EDTA。
細胞膜蛋白激光檢測技術研制成功
據每日科學網近日報道,美國范德比爾特大學研究人員開發出一種新型激光技術,可檢測細胞膜上的蛋白質和其它多種生物分子之間的相互反應。這種檢測將在藥物開發進程中發揮重要作用。 人類細胞中約有7000種蛋白質,其中30%在細胞膜上,控制細胞分子運作機制的信號有60%—70%由這些膜蛋白產生,
細胞膜表面免疫球蛋白測定的臨床意義
免疫缺陷疾病(如無丙球蛋白血癥、聯合免疫缺陷)時M -RFC降低明顯,而EA-RFC、EAC-RFC亦降低。 在慢性淋巴細胞白血病、毛細胞白血病時,M-RFC、EA -RFC、EAC-RFC均顯著升高。
細胞膜表面免疫球蛋白測定的臨床意義
免疫缺陷疾病(如無丙球蛋白血癥、聯合免疫缺陷)時M -RFC降低明顯,而EA-RFC、EAC-RFC亦降低。 在慢性淋巴細胞白血病、毛細胞白血病時,M-RFC、EA -RFC、EAC-RFC均顯著升高。
鋅指核酸酶能以蛋白質形態穿透細胞膜
用于目標基因組修飾的鋅指核酸酶(ZFN)能夠以蛋白質的形態穿透細胞膜,這是近期《自然—方法學》上一項研究得出的結論。這將讓ZFN被投遞至細胞內的過程變得更簡單、更具安全性。 經過設計的核酸酶比如ZFN,能夠讓多個種類的基因組產生特定變化,其對研究和基因療法的輔助作用讓人眼前一亮。核酸酶一般
抗肝細胞膜特異性脂蛋白抗體(ALSP)介紹
ALSP是非疾病特異性,它最常發生于病毒性及原發性自身免疫肝炎,在非肝病的患者,其發生率較低.ALMA為肝特異性抗體之一.抗體的滴度與肝功能的損失程度呈正平行關系.ALSP常用間接免疫熒光法、ELIASA法測定. 間接免疫熒光法實驗原理將熒光素標記在相應的抗體上,直接與相應抗原反應. 第一步,用
細胞膜表面免疫球蛋白測定的注意事項
一、抽血前的注意事項 1、抽血前一天不吃過于油膩、高蛋白食物,避免大量飲酒。血液中的酒精成分會直接影響檢驗結果。 2、體檢前一天的晚八時以后,應禁食,以免影響第二天空腹血糖等指標的檢測。 3、抽血時 應放松心情,避免因恐懼造成血管的收縮、增加采血的困難; 有暈血史者請提前說明,另作特別安
抗肝細胞膜特異性脂蛋白抗體(alsp)介紹
ALSP是非疾病特異性,它最常發生于病毒性及原發性自身免疫肝炎,在非肝病的患者,其發生率較低。ALMA為肝特異性抗體之一。抗體的滴度與肝功能的損失程度呈正平行關系。ALSP常用間接免疫熒光法、ELIASA法測定。 間接免疫熒光法實驗原理將熒光素標記在相應的抗體上,直接與相應抗原反應。 第一步,用
細胞膜表面免疫球蛋白測定的正常值
Smlg陽性細胞均值為21%;SmlgG7.1 %;SmlgM8.9%;SmlgA2.2%;mlgD6.2 %;SmlgE0.9%。
B細胞膜表面免疫球蛋白的參考值
IFA法:SmIg陽性細胞均值為21%(16%~28%)。SmIgG為7.1%(4%~13%);SmIgM為8.9%(7%~13%);SmIgA為2.2%(1%~4%);SmIgD為6.2%(5%~8%);SmIgE為0.9%(1%~1.5%)。
B細胞膜表面免疫球蛋白的臨床意義
主要用于檢測外周血B細胞的百分率。①SmIg降低:見于 免疫缺陷性疾病;②SmIg升高:見于慢性淋巴細胞白血病、多毛細胞白血病和原發性巨球蛋白血癥。巨球蛋白血癥患者SmIgM陽性細胞可高達78%。
如何提取細胞膜(動物細胞)上的蛋白質
一,蛋白質(包括酶)的提取大部分蛋白質都可溶于水、稀鹽、稀酸或堿溶液,少數與脂類結合的蛋白質則溶于乙醇、丙酮、丁醇等有機溶劑中,因些,可采用不同溶劑提取分離和純化蛋白質及酶。(一)水溶液提取法稀鹽和緩沖系統的水溶液對蛋白質穩定性好、溶解度大、是提取蛋白質最常用的溶劑,通常用量是原材料體積的1-5倍,
酪蛋白膠粒的亞膠粒模型基本介紹
酪蛋白結構的亞膠粒模型于1967年由Morr提出,這一模型的主要觀點是: ①酪蛋白膠粒是由許多亞膠粒(sub-micelle)構成的,膠體磷酸鈣(colloidal calcium phosphate,CCP)對亞膠粒和膠粒的形成起關鍵作用; ②構成酪蛋白膠粒的亞膠粒有兩類,一類為不含κ-c
蛋白質結構和功能的基礎模型
蛋白質設計程序使用在體內環境中驅動蛋白質的分子力的計算機模型。為了使問題易于解決,蛋白質設計模型簡化了這些作用力。盡管蛋白質設計程序相差很大,但它們必須解決四個主要的建模問題:設計的目標結構是什么,目標結構允許什么樣的靈活性,搜索中包括哪些序列,以及將使用哪個力場來分數序列和結構。目標結構蛋白質功能